伯乐树cpDNA-PCR反应体系的优化与引物筛选

摘要：

伯乐树为国家一级保护植物,在研究被子植物的系统发育和古地理、古气候等方面具有重要的科学价值.cpDNA-PCR反应是在分子水平上确定伯乐树系统分类的基础.建立了伯乐树cpDNA-PCR反应体系,对影响扩增反应的因素(Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度以及模板DNA浓度)进行了优化,得到了伯乐树cpDNA-PCR扩增反应的最佳体系,并筛选出了适合伯乐树分子谱系地理研究的非编码区序列和引物.伯乐树cpDNA-PCR最佳反应体系为:30μL反应体系含有10×PCR buffer、2.9 mmol Mg2+、120 mmol dNTP、上下游引物各11μmol、DNA模版30 ng以及3个单位的Taq酶.适合于伯乐树分子谱系地理学研究的3对引物及其退火温度为PipetB 1411F-PipetD738R(52℃)、psbA-trnHGUG(59℃)、trnL-trnF(56℃).

关键词：伯乐树、cpDNA、PCR体系优化、引物筛选

所属期刊栏目：33

分类号：S794.9;Q78(森林树种)

资助基金：林业公益性行业科研专项经费项目201104033;湖南省研究生科研创新项目CX2012B326

在线出版日期：2013-08-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：67-71