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猕猴桃ACC氧化酶反义基因转化猕猴桃的研究

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为建立猕猴桃ACC氧化酶反义基因功能研究技术平台并通过生物技术改良猕猴桃,从海沃德猕猴桃(Actinidia chinensis Planch.var.deliciosa‘Hayward’)叶片中提取总RNA,反转录合成cDNA第一链,并以此为模板,扩增得到ACC氧化酶(ACO)基因片段约1 kb,经限制性内切酶图谱分析,组建亚克隆并进行测序,其开放阅读框长957 bp,编码319个氨基酸,与其他已公布的ACC氧化酶cDNA的核苷酸(AB003514.1)及氨基酸序列(BAA21541.1)同源率分别高达94.0%和95.6%,证明所克隆的cDNA序列的准确性.构建该基因的反义表达载体,并通过农杆菌介导的方法成功转化米良一号猕猴桃(Actinidia deliciosa cv.Miliang-1),得到再生苗.取14株经PCR检测,其中10株检测到ACC氧化酶基因目的条带,阳性植株占71.4%.实时荧光定量PCR分析结果显示,再生苗ACO基因的表达量低于野生型58%~81%.

猕猴桃、ACC氧化酶、农杆菌介导、反义表达载体

32

S759.3(森林经营学、森林计测学、森林经理学)

科技计划;湖南省高等学校产学研合作示范基地开放项目

2013-01-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共7页

115-121

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中南林业科技大学学报

1673-923X

43-1470/S

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2012,32(11)

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