油茶亲环素基因的鉴定与其在大肠杆菌中的表达

摘要：

利用构建的油茶近成熟种子cDNA文库,分离鉴定了一条油茶亲环素基因的cDNA序列；该序列全长975 bp(base pair),含有一个621 bp的开放码框,编码207个氨基酸,将其命名为co-cyp(GenBank登录号:FJ377540).该基因与其它物种的亲环素基因具有较高的同源性,结构分析表明该蛋白的二级结构以片层为主,并伴有α-螺旋、β转角和大量的无规则卷曲；其N端有一个强疏水性的信号肽序列,具有跨膜结构和较好的柔性；还具有N-连接糖基化位点、蛋白激酶C磷酸化位点、酪氨酸激酶Ⅱ磷酸化位点、酪氨酸激酶磷酸化位点、N-连接肉豆蔻酰位点、脯氨酸顺反异构酶标志序列、环孢菌素(CsA)结合位点(Trp)以及植物亲环素基因特有的7个氨基酸特征序列KSGKPLH.该蛋白属于亲环素B族,为球状分泌蛋白.在获得油茶亲环素基因全长cDNA的基础上,构建了该基因的原核表达重组子pET30b-CyP,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,获得了约21 kDa的油茶亲环素蛋白.本研究对揭示油茶种子的油脂合成和抗逆性能等生物学规律具有重要意义.

关键词：油茶、亲环素基因、全长cDNA、克隆、原核表达

所属期刊栏目：31

分类号：S794.4(森林树种)

资助基金：国家自然科学基金;湖南省研究生科研创新项目;中南林业科技大学研究生科技创新项目

在线出版日期：2012-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：85-93