博白大果油茶ISSR-PCR反应体系的建立与优化

摘要：

以博白大果油茶Camellia gigantocarpn Hu et Huang为材料,通过单因素实验设计和正交设计L18(35)对影响PCR反应体系的主要成分及PCR扩增程序进行优化.建立了稳定的、可重复的博白大果油茶ISSRPCR扩增反应体系.在20μL的反应体系中,Mg2+浓度为2.5 mmol/L,模板DNA用量为20 ng,Taq DNA聚合酶为1.75 U,dNTPs浓度为0.25 mmol/L,引物浓度为0.6 mm01/L.反应程序为:94℃预变性4 min,94℃变性30 s,50℃退火45 s,72℃延伸90 s,35个循环,72℃延伸7 min,4℃保存.

关键词：博白大果油茶、单因素设计、ISSR-PCR、反应体系优化

所属期刊栏目：31

分类号：S794.4(森林树种)

资助基金：国家林业公益行业科研专项子项目”中国森林对气候变化的影响与林业适应对策研究”200804001;湖南省教育厅学科带头人培养对象基金资助项目2004559

在线出版日期：2011-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：97-103