珙桐cpDNA非编码序列引物反应条件优化与筛选

摘要：

实验采用改良CTAB方法提取总DNA,以珙桐及其近缘种基因组DNA为材料,优化cpDNA非编码序列PCR扩增条件,优据优化的PCR扩增条件,首次筛选出适合于珙桐分子谱系地理学研究的cpDNA非编码序列和引物.结果表明:25μL PCR反应体系中含有50 ng DNA,10×Buffer,2.5 mmol MgCl2,0.4 mmol dNTPs,0.2 μmol primerl,0.2 μmol primer2,1.25 U Pfu DNA Polymerase.适宜的PCR反应程序为94℃5 min,94℃1 min,退火时间45 s,退火温度和72℃延伸时间依不同的引物和产物而不同,35个循环,72℃总延伸7 min.稳定性好的、扩增条带清晰且单一的trnSGCU和trnGUUC、F71和R1516、rps16-F和rps16-R、atpB-49和rbcL-188四对引物可作为进一步珙桐分子谱系地理学研究的引物.

关键词：珙桐、cpDNA、非编码序列、引物筛选

所属期刊栏目：31

分类号：Q51(蛋白质)

资助基金：国家自然科学基金31070484

在线出版日期：2011-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：183-186