杉木ISSR-PCR反应体系的正交优化

摘要：

利用正交设计实验对影响杉木ISSR-PCR扩增的重要因素(Mg2+、dNTP、模板DNA、引物、TaqDNA聚合酶)进行优化,以建立杉木ISSR-PCR反应的最佳体系.结果发现杉木ISSR-PCR最佳反应体系(20μL)为:MgCl2 1.8 mmol/L,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.7 μmol/L,模板DNA 90ng,TaqDNA聚合酶1 U;退火温度为52～55℃.扩增反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,52℃退火40 s,72℃延伸2 min,40个循环;72℃延伸7 min;4℃保存.该反应体系的建立,为杉木种质资源分类、遗传多样性分析提供了更客观可靠的方法.

关键词：杉木、ISSR-PCR、正交优化

所属期刊栏目：31

分类号：S791.27(森林树种)

资助基金：国家自然科学基金31070484

在线出版日期：2011-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：156-159