鹅掌楸ISSR-PCR反应体系的建立及优化

摘要：

为建立鹅掌楸简单序列重复区间扩增ISSR的PCR优化反应体系,以鹅掌楸叶片基因组DNA为材料,系统地测试了模板DNA、引物、dNTPs、Me+浓度、Taq DNA聚合酶用量及退火温度对ISSR-PCR反应体系的影响.结果表明:优化的PCR反应体系为:20μL总体系中,含30ng模板DNA,0.3 μmol·L-1随机引物,0.2mmol·L-1 dNTPs,1.4 mmol·L-1 Mg2+,0.8 U Taq DNA聚合酶;最佳退火温度为60℃;PCR反应程序为:94℃预变性5min;94℃变性1min,60℃退火45s,72℃延伸2min;45个循环;72℃再延伸7min.

关键词：分子生物学、鹅掌楸、叶片基因组DNA、ISSR-PCR、优化

所属期刊栏目：30

分类号：S792.21;S722.3+3(森林树种)

资助基金：湖南省林业厅重点项目2007-10

在线出版日期：2010-09-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：80-84