油茶SRAP标记的PCR体系建立与优化

摘要：

油茶是我国主要的木本食用油料树种,拟建立油茶新型SRAP标记(序列相关扩增多态性)的优化PCR体系,以油茶优良品种的总DNA为材料,分析了影响油茶SRAP-PCR的主要参数,包括模板DNA量、引物浓度、dNTPs、Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶用量、退火温度6个因素的影响,建立了适合油茶SRAP-PCR的优化体系为:20 μL的PCR反应体系中,2.0 μL 10×PCR buffer,2.0 mmol/L Mg2+,225 μmol/L dNTPs,0.6 μmol/L引物,30 ng模板DNA和0.75 UTaq DNA聚合酶;最佳PCR循环条件为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,35℃复性1 min,72℃延伸1 min,5循环;94℃变性1 min,52℃复性1 min,72℃延伸1 min,35循环;最后72℃延伸10 min;4℃保存.本研究结果可为今后利用SRAP这一新型标记技术进行油茶分子遗传学与标记辅助选择育种研究打下基础.

关键词：经济林学、油茶、分子标记、SRAP、PCR、体系优化

所属期刊栏目：30

分类号：S749.4

资助基金：国家科技支撑计划;湖南省自然科学基金

在线出版日期：2010-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：57-62