ARF基因导入烟草的遗传转化研究

摘要：

以烟草无菌苗叶片为外植体,利用叶盘法,将含生长素应答基因(auxin response factor,ARF)的根癌农杆菌LBA4404携带双元质粒载体(pBin438)介导进行遗传转化.结果表明:诱导烟草叶片不定芽的最佳分化培养基为MS+0.8 mg·L-1 6-BA+0.05 mg·L-1 NAA,生根培养基为1/2MS+0.02 mg·L-1 IBA+0.02 mg·L-1NAA,分化率、生根率分别为96.9%、96.7%;将预培养3 d的外植体与农杆菌菌液浸染3～5 min后,共培养2～3 d,然后转化到含Km75 mg·L-1的选择培养基上进行分化筛选,再转入Km为75 mg·L-1、100 mg·L-1的培养基上进行生根筛选,生根率为66.1%;与对照相比,转基因烟草在形态上发生了明显的改变,叶片颜色变深绿,叶片增厚,主叶脉变粗壮等.PCR扩增,获得40株阳性转基因苗,证明ARF基因已导入烟草中.

关键词：生物技术、ARF基因、烟草、根癌农杆菌、遗传转化

所属期刊栏目：27

分类号：Q813.2;S572(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）G19990160

在线出版日期：2008-04-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：6-12