油茶ISSR反应体系建立及优化

摘要：

以改进的CTAB高盐法提取油茶嫩叶总DNA,进行简单重复序列间扩增(ISSR)分析,分别测试了退火温度、模板DNA浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、TaqDNA聚合酶用量和是否加入去离子甲酰胺对反应结果的影响.油茶ISSR分析的最适反应体系为:在20 μL PCR反应体积中,含20 ng模板DNA,2.5 mmol·L-1MgCl2,0.2 mmol·L-1dNTPs,1UTaqDNA聚合酶,0.5 pmol·μL-1引物,1%去离子甲基酰胺.扩增程序为:94℃预变性2 min;94℃变性30 s,52℃退火30 s,72℃延伸90 s,反应38个循环;最后在72℃延伸7 min.

关键词：林学、油茶、ISSR、反应条件、优化

所属期刊栏目：26

分类号：S792.4(森林树种)

资助基金：江西省林科院院长基金

在线出版日期：2007-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：22-26,43