大肠杆菌表达重组Taq DNA聚合酶的分离和纯化

摘要：

以插入Taq DNA聚合酶基因的pET-24a表达质粒转化E.coli菌株,表达Taq DNA聚合酶,用反复冻融的方法裂解菌体,表达产物为可溶性蛋白,采用Duo-Flow系统(Bio-Rad)及S柱,Tris缓冲液pH为7.5,以0～1 mol/L盐梯度洗脱方式,收集洗脱峰,透析去盐可得到高纯度的产品.经PCR反应与商品Taq酶的一个活性单位相比较,重组的Taq酶活性有1个单位.用该方法可以从1 L培养液中分离得到5.51 mg产品.

关键词：生物技术、Taq DNA聚合酶、大肠杆菌、表达、分离、纯化

所属期刊栏目：26

分类号：Q784(基因工程（遗传工程）)

资助基金：教学改革项目2005-34

在线出版日期：2006-12-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：50-54