miR-199a-5p和miR-206靶向调控SULF1并抑制卵巢上皮细胞对顺铂的敏感性

摘要：

目的 SULF1是硫酸酯酶家族成员之一,主要发挥肿瘤抑制因子的作用,在多种肿瘤中低表达,本研究旨在筛选直接靶向SULF1的microRNAs,并验证候选microRNAs对SULF1表达的负调控作用.方法 利用Tar-getScanHuman 7.2、miRDB、DIANA和RNAhybrid数据库预测调控 SULF1 的 microRNAs.利用实时荧光定量PCR和 Western blotting实验探索microRNAs对SULF1表达的影响.双荧光素酶报告基因实验探究microRNAs和SULF1基因的直接结合能力.CCK-8实验验证microRNAs对铂类药物敏感性的影响.结果 利用数据库预测到两个microRNAs:miR-199a-5p和miR-206,二者均可靶向SULF1的3'-UTR区域.实时荧光定量PCR结果显示,与IOSE80细胞中的阴性对照相比,miR-199a-5p和miR-206对应的模拟物(mimics)分别使SULF1的mRNA表达水平降低至23.07％和20.11％,而它们的抑制剂(inhibitors)则分别使SULF1的mRNA表达水平升高3.62倍和3.09倍.Western blotting结果表明,miR-199a-5p和miR-206也可降低SULF1蛋白表达水平.双荧光素酶报告基因实验表明,miR-206和miR-199a-5p均可直接结合SULF1的3'-UTR,且miR-206具有更强的调控作用.CCK-8实验结果表明,降低miR-199a-5p和miR-206的表达水平可显著增强IOSE80细胞对顺铂的敏感性(IC50:9.287 μmol·L-1/11.32 μmol·L-1 vs.16.75 μmol·L-1),相反,二者过表达可显著降低IOSE80细胞对顺铂的敏感性.结论 miR-199a-5p和miR-206均可直接与SULF1的3'-UTR结合,下调SULF1表达,降低卵巢细胞对顺铂的敏感性.

关键词：SULF1、miR-199a-5p、miR-206、顺铂敏感性

所属期刊栏目：12

分类号：R730.22(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;湖南省自然科学基金

在线出版日期：2022-10-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：472-480