10.3969/j.issn.2095-1264.2019.04.09
慢病毒介导Akt1shRNA载体转染对人肝母细胞瘤细胞株HepG2凋亡和增殖的影响
目的 探究慢病毒介导Akt1 shRNA载体转染对人肝母细胞瘤细胞株HepG2凋亡和增殖水平的影响.方法 以人肝母细胞瘤细胞株HepG2为研究对象,将其分为空白对照组(A组)、空白载体病毒组(B组)和ShRNA-Akt1慢病毒组(C组).A组细胞未作任何处理,B组细胞转染空白载体慢病毒,C组细胞转染shRNA-Akt1载体构建的慢病毒.利用短发夹RNA(shRNA)干扰技术构建Akt1的基因下调载体,通过慢病毒转染HepG2细胞,qPCR和Western blotting检测凋亡相关因子Caspase-3和Caspase-9的表达;CCK-8法检测细胞增殖能力;Transwell法检测细胞侵袭能力;Annexin-V/PI法检测细胞凋亡水平.结果 shRNA-Akt1载体慢病毒转染滴度为8×107TU·mL-1.三组细胞的Akt1 mRNA相对表达量比较,差异均具有统计学意义(F=9.904,P=0.025),且C组显著低于A组和B组(q=3.092,2.009;P--0.019);三组细胞的Caspase-3和Caspase-9 mRNA相对表达量比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05),且C组显著高于A组和B组(P＜0.05).Westernblotting检测结果显示,三组细胞的Akt1蛋白水平比较,差异均具有统计学意义(F=11.002,P=0.011),且C组显著低于A组和B组(q=2.887,2.457;P--0.014);三组细胞的Caspase-3和Caspase-9蛋白水平比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05),且C组显著高于A组和B组(P＜0.05).CCK-8结果显示,C组细胞增殖率显著低于B组和A组(q=2.009,3.901;P＜0.05).Transwell结果显示,C组细胞的侵袭能力显著低于B组和A组(q=2.127,2.157;P＜0.05).Annexin-V/PI结果显示,C组细胞凋亡率显著高于B组和A组(q=2.445,2.659;P＜0.05).结论 慢病毒介导Akt1 shRNA载体可抑制HepG2细胞增殖和侵袭,并促进其凋亡,可作为肝癌的潜在治疗靶点.
Akt1、HepG2细胞、侵袭、增殖、凋亡
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R735.7(肿瘤学)
2019-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
572-577
