miRNA-4766-5p在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响

摘要：

目的:探讨卵巢癌组织中miRNA-4766-5p（miR-4766-5p）的表达及miR-4766-5p体外对卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响及其相关机制。方法:选取2019年2月至2020年12月华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院行手术治疗的32例卵巢癌患者的癌组织及癌旁组织，选择卵巢癌细胞株（A2780、OC3、SKOV-3、HO-8910、OVCAR-3）及正常卵巢上皮细胞株IOSE80用于后续实验。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-4766-5p在卵巢癌组织和各细胞株中的相对表达量。以miR-4766-5p相对表达量最低的细胞株为实验对象，分别转染阴性对照质粒（对照组）和表达miR-4766-5p的质粒（miR-4766-5p组）。采用CCK-8法和Transwell实验分别检测过表达miR-4766-5p对所选细胞株细胞增殖和侵袭能力的影响。采用PITA和starBase V2.0软件预测miR-4766-5p的靶基因，并通过双荧光素酶报告基因法进行验证。采用qRT-PCR和蛋白质印迹法检测过表达miR-4766-5p对所选细胞株靶基因表达的影响。结果:卵巢癌组织和癌旁组织中miR-4766-5p相对表达量分别为1.06±0.17和5.25±0.70，差异有统计学意义（
t=5.86，
P<0.01）。与IOSE80细胞比较，各卵巢癌细胞株中miR-4766-5p相对表达量均降低（均
P<0.01），其中OC3细胞中miR-4766-5p相对表达量最低，用于后续实验。CCK-8法检测显示，培养2、3、4 d后miR-4766-5p组OC3细胞吸光度值均低于对照组（均
P<0.05）。Transwell实验显示，miR-4766-5p组和对照组OC3细胞的穿胶细胞数分别为（25±6）个和（86±11）个，差异有统计学意义（
t=4.77，
P<0.01）。采用PITA和starBase V2.0软件预测miR-4766-5p与微管去稳定蛋白1（STMN1）mRNA可能存在结合位点；双荧光素酶报告基因检测结果显示，miR-4766-5p的靶基因可能为STMN1。miR-4766-5p组和对照组OC3细胞中STMN1 mRNA相对表达量分别为0.28±0.05和1.00±0.05，差异有统计学意义（
t=10.47，
P<0.01）。与对照组相比，miR-4766-5p组OC3细胞STMN1蛋白表达降低，上皮细胞表型蛋白β-catenin表达升高，间质细胞表型蛋白Snail表达降低，细胞周期蛋白CDK2、cyclin E表达均降低。
结论:miR-4766-5p在卵巢癌组织和卵巢癌细胞株中均低表达；miR-4766-5p可能通过下调其靶基因STMN1的表达，抑制卵巢癌细胞的增殖和侵袭。

关键词：卵巢肿瘤、微RNAs、细胞增殖、细胞侵袭、miRNA-4766-5p

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资助基金：湖北省卫生健康委指导性项目WJ2021F003;Guiding Project of Health Commission of Hubei ProvinceWJ2021F003

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：885-890