二烯丙基三硫化物对人胃癌细胞株BGC823和AGS叶酸受体α表达的影响及相关调控机制

摘要：

目的:探讨二烯丙基三硫化物（DATS）对人胃癌细胞叶酸受体α（FRα）表达的影响及相关调控机制。方法:选择人胃癌细胞株BGC823、AGS，用10、20、40、80 μmol/L DATS处理BGC823细胞48 h，5、10、20、40 μmol/L DATS处理AGS细胞48 h，以6 μmol/L组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂曲古抑菌素A（TSA）处理细胞作为表观遗传研究的阳性对照，以未经DATS处理的细胞作为阴性对照。采用流式细胞术检测DATS诱导胃癌细胞凋亡情况。在DATS处理BGC823、AGS细胞48 h后，换无DATS细胞培养液培养不同时间，检测FRα蛋白表达变化。采用6 μmol/L TSA或40 μmol/L DATS处理BGC823细胞和AGS细胞，蛋白质印迹法检测FRα、HDAC1和HDAC2以及组蛋白H3赖氨酸9位点乙酰化修饰（H3K9ac）和组蛋白H4赖氨酸5位点乙酰化修饰（H4K5ac）蛋白表达水平。应用BGC823细胞接种BALB/c裸鼠，建立移植瘤模型，DATS组裸鼠腹腔注射10 mg/kg DATS 16 d后，提取荷瘤组织蛋白，进行靶蛋白表达的检测；对照组注射等量0.9% NaCl溶液。结果:BGC823和AGS细胞经梯度浓度DATS处理后细胞FRα蛋白表达均呈剂量依赖性上调（
F＝65.68，
P<0.01；
F＝26.65，
P<0.01）。撤除DATS后，BGC823和AGS细胞FRα蛋白表达逐渐降低并恢复至初始水平（
F＝74.57，
P<0.01；
F＝30.92，
P<0.01）。随着DATS处理浓度的增加，BGC823、AGS细胞凋亡率均增加（
F＝32.95，
P<0.01；
F＝38.97，
P<0.01）。BGC823、AGS细胞经TSA处理后FRα蛋白表达分别上调约4.5倍（
t＝-12.62，
P<0.01）和3.6倍（
t＝-10.00，
P<0.01）。分别经40、20 μmol/L DATS作用后，BGC823和AGS细胞FRα蛋白表达水平上调（均
P<0.01），HDAC1、HDAC2的表达受抑制（均
P<0.01），H3K9ac和H4K5ac的乙酰化修饰水平升高（均
P<0.01）。裸鼠荷瘤实验显示，给药后第16天，DATS组移植瘤体积小于对照组[（214±39）mm
3比（577±98）mm
3]，差异有统计学意义（
t＝4.86，
P<0.01）。与对照组相比，DATS组移植瘤组织FRα蛋白表达上调约2倍（
t＝-5.29，
P<0.01），HDAC1和HDAC2蛋白表达水平均下调（
t＝9.36，
P<0.01；
t＝9.88，
P<0.01）。
结论:DATS以剂量依赖和可逆性方式上调人胃癌BGC823、AGS细胞FRα蛋白表达，其机制可能与DATS影响肿瘤细胞组蛋白乙酰化修饰有关。

关键词：胃肿瘤、二烯丙基三硫化物、乙酰化、叶酸受体α

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资助基金：北京市自然科学基金7152029;Natural Science Foundation of Beijing7152029

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：565-571