腺病毒介导的东亚钳蝎氯毒素对人胶质瘤U251细胞的作用

摘要：

目的:探讨腺病毒介导的人工合成东亚钳蝎氯毒素（Ad-rBmK CTa）对人胶质瘤U251细胞的抑制作用及其相关机制。方法:设置3.5×10
9、7.0×10
9、3.5×10
10pfu/ml三个效价梯度Ad-rBmK CTa组，分别作用于U251细胞24、48、72 h，同时设置空白对照组（不加入细胞和Ad-rBmK CTa）、阴性对照组（只加入U251细胞）。通过激光共聚焦荧光显微镜观察病毒感染情况；采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各组细胞增殖情况；采用流式细胞术检测各组细胞周期及细胞凋亡；采用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白bax、bcl-2和caspase-3表达情况。
结果:Ad-rBmK CTa作用于U251细胞24 h后感染效率达90%以上。随着Ad-rBmK CTa效价升高，作用相同时间的U251细胞增殖抑制率逐渐升高（均
P<0.01）；随着时间延长，同一效价Ad-rBmK CTa作用的U251细胞增殖抑制率亦逐渐升高（均
P<0.01）。7.0×10
9 pfu/ml Ad-rBmK CTa作用于U251细胞48 h后，G
0/G
1期细胞比例为（40.7±0.8）%，S期和G
2期细胞比例分别为（35.7±0.6）%、（23.6±1.4）%，差异具有统计学意义（
F=225.119，
P<0.01）。7.0×10
9 pfu/ml Ad-rBmK CTa作用于U251细胞24、48、72 h时，细胞凋亡率分别为（7.4±1.4）%、（19.2±1.7）%和（22.3±1.7）%，差异有统计学意义（
F=49.470，
P<0.01）。7.0×10
9 pfu/ml Ad-rBmK CTa作用于U251细胞48 h后，与阴性对照组相比，bax、caspase-3蛋白的表达水平升高，bcl-2蛋白表达水平下降。
结论:Ad-rBmK CTa可能作用于DNA损伤诱导的G
1/S检测点，使细胞周期停滞于G
0/G
1期，从而抑制U251细胞的体外增殖，但其诱导U251细胞凋亡的作用并不明显。其机制可能与氯离子
-通道直接或间接受到抑制相关。

关键词：神经胶质瘤、腺病毒科、蝎毒素、细胞周期、细胞凋亡、氯化物通道

所属期刊栏目：33

资助基金：山西省自然科学基金2015011120;Natural Science Foundation of Shanxi Province2015011120

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：264-269