10.3760/cma.j.cn115355-20200603-00301
骨肉瘤原代癌相关成纤维细胞对骨肉瘤SOSP-9607细胞增殖的影响
目的:探讨骨肉瘤微环境中的癌相关成纤维细胞(CAF)对骨肉瘤SOSP-9607细胞增殖的影响及可能机制。方法:通过原代培养获得骨肉瘤来源的CAF及癌旁组织正常成纤维细胞(NF),使用流式细胞术检测CAF和NF的α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和成纤维细胞活化蛋白(FAP)的表达。收集CAF、NF的培养液,制备为相应条件培养液。将SOSP-9607细胞分为对照组、NF处理组、CAF处理组,分别应用新制备的未经处理的培养液及CAF、NF条件培养液处理。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测SOSP-9607细胞各处理组细胞增殖能力,实时荧光定量聚合酶链反应、蛋白质印迹法检测各SOSP-9607细胞组cyclin D1表达水平。结果:CAF中α-SMA和FAP阳性率分别为(86±5)%和(74±8)%,NF中分别为(15±3)%和(10±1)%,CAF与NF间差异均有统计学意义(
t=20.83,
P<0.05;
t=14.30,
P<0.01)。MTT法检测显示,CAF处理组SOSP-9607细胞培养24 h后能够促进细胞增殖;96 h后490 nm处吸光度值达到1.83±0.26,NF处理组为1.40±0.17,对照组为1.35±0.15,差异有统计学意义(
F=8.59,
P<0.05)。CAF处理组SOSP-9607细胞培养48 h后,cyclin D1 mRNA相对表达量上升至1.57±0.13,NF处理组为1.05±0.15,对照组为1,三组间差异有统计学意义(
F=23.09,
P<0.05),同时cyclin D1蛋白的表达水平也明显增强。
结论:CAF能够促进骨肉瘤SOSP-9607细胞增殖,并促进cyclin D1基因的表达。
骨肉瘤、癌相关成纤维细胞、细胞增殖、细胞周期蛋白D
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国家自然科学基金81502671;National Natural Science Foundation of China81502671
2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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