miRNA-210在食管鳞状细胞癌放疗患者血浆中表达的变化及其体外对食管鳞状细胞癌Eca109细胞的影响

摘要：

目的:探讨食管鳞状细胞癌患者放疗前后血浆miRNA-210（miR-210）表达的变化及其体外对食管鳞状细胞癌细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法:收集2013年12月至2015年3月山东省临沂市人民医院22例初治食管鳞状细胞癌患者（食管癌组）根治性放疗前后及15名健康志愿者（健康对照组）血液标本。以miRNA-21（miR-21）为阳性对照。应用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测患者放疗前后血浆miR-210和miR-21的表达水平及常氧和乏氧食管鳞状细胞癌Eca109细胞中miR-210的表达。采用EdU细胞增殖实验、流式细胞术检测未转染组（空白对照组）、转染miR-210模拟物阴性对照RNA组（阴性对照组）、转染miR-210模拟物RNA组（miR-210组）Eca109细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡情况。结果:食管癌组及健康对照组共采集合格血液样本59份。食管癌组放疗前血浆miR-210、miR-21的相对表达量[中位数（
P25，
P75）]较健康对照组升高，差异均有统计学意义[4.04×10
-4（2.06×10
-4，6.68×10
-4）比0.54×10
-4（0.28×10
-4，0.77×10
-4），397.07×10
-4（181.77×10
-4，742.93×10
-4）比127.43×10
-4（21.97×10
-4，184.65×10
-4）；
U值分别为37.0、49.0，均
P<0.01]。食管癌组患者治疗前血浆miR-210、miR-21表达水平与肿瘤部位和分化程度均无关（均
P>0.05）。根治性放疗1周后，食管癌组血浆miR-210、miR-21的相对表达量分别为65.33×10
-4（22.15×10
-4，160.87×10
-4）、437.23×10
- 4（327.18×10
-4，749.09×10
-4），均较放疗前升高（
U值分别为32.0、154.0，均
P<0.05），其中miR-210升高更为显著。Eca109细胞乏氧培养12 h后, miR-210的表达水平较常氧组增高，24 h后达峰值，差异有统计学意义（
P<0.01）。EdU细胞增殖实验显示，miR-210组转染24、48 h后Eca109细胞增殖活力较阴性对照组和空白对照组均下降，差异均有统计学意义（均
P<0.01）。流式细胞术分析显示，转染24 h后，同阴性对照组和空白对照组相比，miR-210组Eca109细胞G
2/M期比例增高，差异有统计学意义（
P<0.05）；转染48 h后，G
2/M期比例增高更明显（
P<0.01）；转染24、48 h后，三组凋亡细胞比例差异均无统计学意义（均
P>0.05）。
结论:miR-210在食管鳞状细胞癌患者血浆中高表达，尤其是在根治性放疗后血浆miR-210表达水平明显升高。miR-210在乏氧食管鳞状细胞癌Eca109细胞中高表达，miR-210过表达可抑制细胞增殖，其机制可能与G
2/M期阻滞相关。

关键词：食管肿瘤、癌，鳞状细胞、miRNA-210、细胞增殖、细胞周期、放射疗法

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资助基金：山东省自然科学基金ZR2014HL061;山东省医药卫生科技发展计划2016WS0224;Natural Science Foundation of Shandong ProvinceZR2014HL061;Medical and Health Science Technology Project of Shandong Province2016WS0224

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：467-473