10.3760/cma.j.issn.1006-9801.2019.09.002
HOXA末端转录本反义RNA在肝癌组织中的表达及对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭 与迁移能力的影响
目的 探讨HOXA末端转录本反义RNA(HOTTIP)在肝癌组织中的表达以及对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭与迁移能力的影响.方法 收集2012年1月至2018年6月在辽宁省丹东市第一医院经手术切除的肝癌组织及对应的癌旁组织标本各60例,应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测HOTTIP在肝癌组织及癌旁组织中的表达情况,并分析表达情况与临床病理特征的关系.通过细胞转染技术构建HOTTIP高表达HepG2细胞株为实验组,设空载质粒pcDNA3.1-NC为对照组.CCK-8法检测HOTTIP对HepG2细胞增殖能力的影响,Transwell法检测HOTTIP对HepG2细胞侵袭与迁移能力的影响.结果HOTTIP mRNA在肝癌组织中的表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(1.9±0.6比0.9±0.7,t=6.069,P<0.01).以HOTTIP mRNA表达中位值(1.92)为临界点,将60例肝癌病例分为高表达组(30例)和低表达组(30例).HOTTIP表达与TNM分期、分化程度及淋巴结转移有关(χ2值分别为10.800、8.076、5.711,均P<0.05),与患者年龄、性别、肿瘤直径、肿瘤数目、有无合并肝炎及甲胎蛋白(AFP)水平无关(均P>0.05).RT-qPCR结果显示转染过表达HOTTIP肝癌HepG2细胞中HOTTIP mRNA表达增加,与对照组相比差异有统计学意义(63±6比13±9,t=9.129,P<0.01).CCK-8法实验结果提示HepG2细胞过表达HOTTIP后细胞增殖活力增强(24、36、72 h在490 nm处吸光度分别为1.497±0.017比0.826±0.006、2.002±0.025比1.211±0.020、3.257±0.042比1.772±0.021),差异均有统计学意义(t值分别为5.321、7.349、8.793,均P<0.01).Transwell侵袭实验中,实验组转入底层膜的细胞数为(101±9)个,多于对照组的(41±11)个,差异有统计学意义(t=6.839,P<0.01).Transwell迁移实验中,实验组转入底层膜的细胞数为(112±9)个,多于对照组的(53±11)个,差异有统计学意义(t=7.105,P<0.01).结论 HOTTIP在肝癌组织中表达上调,过表达HOTTIP后能够促进肝癌细胞的增殖、侵袭与迁移.
肝肿瘤、HOXA末端转录本反义RNA、细胞增殖、肿瘤侵润、肿瘤转移
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2019-10-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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