通关藤总皂苷对人肝癌HepG2细胞增殖抑制作用的研究

摘要：

目的 探讨通关藤总皂苷对人肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用及其机制.方法 将常规培养的HepG2细胞分为实验组、 空白对照组和通关藤苷A对照组,实验组加入不同质量浓度(0.14、0.29、0.58、1.15、2.13 mg/ml)的通关藤总皂苷溶液处理,通关藤苷A对照组加入通关藤苷A 1.0 mg/ml处理,同时设立空白对照组.四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测通关藤总皂苷对HpeG2细胞活力的影响,并用倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;蛋白质印迹法检测药物作用后细胞凋亡相关蛋白的表达.结果 细胞活性检测结果显示通关藤总皂苷浓度0.29、0.58、1.15、2.13 mg/ml时,对HepG2细胞的增殖具有抑制作用,并且与浓度呈正相关,通关藤总皂苷抑制HepG2细胞生长的半数抑制浓度(IC 50)为0.75 mg/ml.倒置显微镜观察通关藤总皂苷作用后贴壁细胞明显减少,细胞脱落成团,碎片增加.流式细胞术检测结果显示通关藤总皂苷可增加HepG2细胞晚期凋亡比例(P<0.01);蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白结果显示,实验组(通关藤总皂苷0.58、2.13 mg/ml)、通关藤苷A对照组与空白对照组bcl-2蛋白的表达量分别为0.62±0.16、0.31±0.15、0.84±0.09和1.00±0.11,bax蛋白的表达量分别为0.75±0.10、0.83±0.12、1.00±0.14和0.15±0.02,p53蛋白的表达量分别为0.63±0.08、0.78±0.11、1.00±0.13和0.18±0.02,通关藤总皂苷实验组细胞bcl-2蛋白表达下降,bax、p53蛋白表达上升,与空白对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 通关藤总皂苷通过上调p53基因进一步上调bax,并且抑制bcl-2的表达,从而引起级联反应,诱导人肝癌HepG2细胞凋亡,其抑制作用可能通过线粒体途径导致细胞凋亡实现.

关键词：肝肿瘤、基因、肿瘤抑制、通关藤总皂苷、HepG2细胞、细胞凋亡

所属期刊栏目：31

资助基金：山西省基础研究项目青年科技研究基金2015021197 Science and Technology Research Foundation for Youth of Basic Research Project of Shanxi Province 2015021197

在线出版日期：2019-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：73-77