5-氮杂-2'脱氧胞苷对子宫颈癌SiHa细胞E-钙黏蛋白基因启动子甲基化及蛋白表达的影响

摘要：

目的 探讨特异性甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2'脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人子宫颈癌SiHa细胞E-钙黏蛋白(E-cad)基因启动子甲基化、蛋白表达情况和细胞生物学行为的影响.方法 应用不同浓度的5-Aza-CdR处理SiHa细胞,甲基化特异性定量聚合酶链反应(QMSP)检测处理前后E-cad基因启动子CpG岛甲基化水平;选取最适浓度设定实验组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白印迹法检测E-cad mRNA及其蛋白表达情况;采用细胞黏附实验检测细胞黏附能力;采用Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力.结果 在5-Aza-CdR 0、1、5、10、15μmol/L时测得E-cad基因启动子区甲基化指数(PMR)值分别为(53.0±1.6)%、(50.0±1.2)%、(44.0±1.4)%、(27.0±1.7)%、(15.0±8.2)%,且随着5-Aza-CdR浓度的增加,PMR值逐渐降低.在15μmol/L时PMR值最低,与其他4组相比差异有统计学意义(P<0.01),选取15μmol/L作为5-Aza-CdR后续实验浓度.与空白对照组相比较,5-Aza-CdR组中E-cad mRNA及其蛋白的表达水平均上升,差异均有统计学意义(均P<0.05);细胞黏附率、细胞侵袭抑制率和迁移抑制率均升高,差异有统计学意义(均P<0.05).结论 5-Aza-CdR能上调子宫颈癌SiHa细胞E-cad mRNA及其蛋白的表达水平,降低细胞的侵袭及迁移能力,促进SiHa细胞黏附,同时在一定程度上逆转E-cad基因启动子区高甲基化状态.

关键词：宫颈肿瘤、E钙黏着蛋白质类、DNA甲基化

所属期刊栏目：29

分类号：R73;R71

资助基金：湖南省自然科学基金14JJ7090;湖南省科技厅课题2013FJ3129Natural Science Foundation of Hunan Province14JJ7090;Project of Science &Technology Department of Hunan Province of China2013FJ3129

在线出版日期：2017-11-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：653-657