人类端粒酶反转录酶-肿瘤抑素联合人类端粒酶反转录酶-胸苷激酶/丙氧鸟苷系统对肝癌HepG2细胞的作用

摘要：

目的 观察人类端粒酶反转录酶-胸苷激酶/丙氧鸟苷(phTERT-TK/GCV)联合人类端粒酶反转录酶-肿瘤抑素(phTERT-tumstatin)对肝癌细胞HepG2凋亡以及肝癌相关基因甲胎蛋白(AFP)、RhoC的mRNA及蛋白表达情况的影响.方法 细胞分为未转染组、转染空质粒hTERT-EGFP组(空质粒组)、转染phTERT-tumstatin组(TM组)、转染phTERT-TK后加50 μg/ml GCV组(TK/GCV组)、共转染phTERT-tumstatin和phTERT-TK后加50μg/ml GCV组(MK组).荧光显微镜观察转染肝癌细胞HepG2和肝细胞L-02中EGFP与MCHERRY的表达;采用实时荧光定量PCR与Western blot检测各组AFP与RhoC在mRNA及蛋白水平表达的变化,流式细胞术检测各组转染后HepG2凋亡状况.结果 phTERT-tumstatin、phTERT-TK/GCV转染后两基因在肝癌细胞HepG2特异性表达;TK/GCV组、TM组及MK组AFPmRNA相对表达量分别为0.76±0.09、0.62±0.09、0.49±0.07,RhoC mRNA相对表达量分别为0.80±0.04、0.40±0.02、0.54±0.03,与空质粒组(0.94±0.04、0.94±0.02)比较差异均有统计学意义(P＜0.05),且MK组较TK/GCV组、TM组AFP、RhoC mRNA相对表达差别显著.TK/GCV组、TM组、MK组、空质粒组和未转染组的AFP蛋白相对表达水平分别为0.97±0.02、0.83±0.02、0.69±0.01、1.19±0.03、1.15±0.05,RhoC蛋白相对表达水平分别为1.17±0.01、0.99±0.02、0.77±0.02、1.32±0.05、1.29±0.30(均P＜ 0.01).phTERT-tumstatin、phTERT-TK/GCV共同转染HepG2细胞的凋亡率较二者单独转染组显著升高,二者单独及共转染组凋亡率较转染空质粒组及未转染组差异有统计学意义(P＜0.01).结论 phTERT-TK/GCV及phTERT-tumstatin对肝癌细胞HepG2有显著促凋亡的作用,二者联合作用更强.

关键词：单纯疱疹病毒胸苷激酶、肿瘤抑素、肝肿瘤、hTERT启动子

所属期刊栏目：26

资助基金：山西省自然科学基金2012011038-6

在线出版日期：2014-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：658-662