RNA干扰逆转肾癌细胞A498对长春新碱化疗耐药的研究

摘要：

目的 研究RNA干扰(RNAi)对肾癌细胞多药耐药基因(mdr-1)表达的抑制作用,并分析干扰前后肾癌细胞对长春新碱(VCR)药物敏感性的变化.方法 根据mdr-1基因设计3条小干扰RNA(siRNA)序列,在质粒的介导下转染肾癌A498细胞,RT-PCR法分析转染前后mdr-1 mRNA表达水平,筛选出干扰效率最高的siRNA序列;进而利用慢病毒包装siRNA重组质粒,感染A498细胞,RT-PCR法筛选沉默效果最好的细胞株进行克隆,Western blotting法检测mdr-1蛋白表达水平,MTT法对比干扰前后VCR对细胞半抑制浓度(JC50)的变化;相关数据统计通过SPSS10.0软件进行.结果 siRNA-1序列使mdr-1 mRNA表达水平下降67%,其稳转细胞株mdr-1蛋白表达量明显下降(P<0.01),并使VCR对细胞的JG50降低约83.25%(P<0.01).结论 RNAi技术可有效抑制肾癌A498细胞mdr-1基因的表达,并可显著增加其对VCR的敏感性,从而使肾癌细胞化疗耐药逆转成为可能.

关键词：RNA干扰、RNA,小分子干扰、P糖蛋白、长春新碱

所属期刊栏目：22

在线出版日期：2010-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：391-395