下调WT1基因对K562细胞血管内皮生长因子表达的影响

摘要：

目的 探讨WT1基因沉默对人类白血病细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 将已构建的WT1小发夹RNA(shRNA)质粒载体转染入K562细胞,流式细胞术检测转染效率并对转染细胞进行分选,实时荧光定量PCR检测细胞转染前后WT1及VEGF基因mRNA的表达变化,用ELISA检测转染前后细胞培养液中VEGF浓度的变化.结果 转染48h,WT1shRNA质粒转入K562细胞,转染效率为(65±4.5)%,通过流式细胞术分选,可以得到纯度达98%以上的WT1shRNA阳性细胞,转染后的K562细胞WT1及VEGF基因mRNA表达较转染前及对照组均明显降低(P＜0.05),转染后48、72h细胞培养液中VEGF的含量较对照组明显降低(P＜0.05).结论 WT1干扰质粒在体外可以抑制白血病细胞株VEGF的表达,提示WT1基因可能通过上调VEGF基因的表达而参与白血病的血管新生.

关键词：基因、肾母细胞瘤、RNA干扰、白血病、血管内皮生长因子

所属期刊栏目：20

分类号：R735.2(肿瘤学)

资助基金：山西省自然科学基金20051102

在线出版日期：2008-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：152-154,157