稳定转染HBx基因的HepG2细胞对raf-1表达的影响

摘要：

目的 探讨乙型肝炎病毒x(HBx)蛋白致癌变的分子机制.方法 构建HBx基因真核表达载体pCDNA3.1(+)-x,脂质体转染入HepG2细胞(HepG2X细胞),以pCDNA3.1空载体为对照(HepG2X0细胞),G418选择培养,克隆扩增转染细胞,并用Western blot检测X蛋白的表达;MTS实验检测细胞增生情况;流式细胞仪检测细胞周期变化;检测转染组及对照组raf-1的表达变化.结果 转染组X细胞在相对分子质量为21×103位置有X蛋白的表达,而对照组HepG2X0细胞及未处理的HepG2细胞未见X蛋白的表达.MTS结果显示X细胞增生能力显著高于其他两株细胞(P＜0.01).流式细胞仪结果显示转染后的细胞系凋亡率增高,G1/G0期细胞减少,G2期细胞增多.Western blot结果示转染组X细胞raf-1表达明显较其他两组细胞增高.结论 HBx有推进细胞周期的作用,使细胞快速进入G2期.其机制可能是HBx增加细胞周期蛋白raf-1的表达.

关键词：肝炎病毒、乙型、X蛋白、细胞周期、raf-1蛋白

所属期刊栏目：19

分类号：R73-3(肿瘤学)

在线出版日期：2008-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：724-726