荧光定量聚合酶链反应检测癌组织β-微管蛋白Ⅲ基因表达方法学的建立

摘要：

目的 建立荧光定量聚合酶链反应RT-PCR检测癌组织β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulin Ⅲ)表达的方法.方法 提取组织标本的总RNA,反转录合成cDNA,PCR扩增产物连接到T载体,筛选重组体,将重组体再培养纯化,制备β-tubulin Ⅲ和看家基因β-actin的标准品,测序验证读码框的正确性.结果 以Ct值为纵坐标,5～7个不同浓度的β-tubulin Ⅲ和β-actin标准品的浓度对数值为横坐标制作标准曲线,线性相关系数均为0.99.结论 构建的两个基因β-tubulin Ⅲ和β-actin的标准品可以得到良好的标准曲线,且标准曲线显示好的线性关系.该法特异性好,灵敏度高,重复性好,可作为临床标准化的检测方法.

关键词：荧光定量聚合酶链反应、肺肿瘤、β-微管蛋白Ⅲ、β-actin

所属期刊栏目：19

分类号：R73-3(肿瘤学)

资助基金：广州市科技局重点科技攻关计划2001-Z-044-01;广东省医药卫生科研项目2003-1;广东省名医工程研究项目2004-25

在线出版日期：2007-09-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：440-442,449