磷酸酶PHLPP2抑制GPX4活性增强非小细胞肺癌铁死亡诱导剂RSL3敏感性的作用分析

摘要：

[目的]探讨磷酸酶PHLPP2在铁死亡诱导剂RSL3诱导非小细胞肺癌细胞铁死亡发生中的作用及机制.[方法]体外培养人肺癌细胞株,GPX4抑制剂RSL3处理后MTT法检测RSL3抑制非小细胞肺癌细胞增殖作用,实时荧光定量PCR检测mRNA水平,Western blot法检测蛋白表达.流式细胞术检测脂质ROS水平,分别采用逆转录病毒/腺病毒感染上调/下调PHLPP2表达,两组间比较采用独立样本t检验.[结果]RSL3有效抑制非小细胞肺癌细胞的活力,RSL3处理后HCC827、H1975、H1650、A549和H1299细胞的增殖率分别为15.22％±2.35％、25.05％±5.92％、4.40％±1.61％、41.48％±10.01％和 13.17％±2.54％.PHLPP2 表达水平最高的H1650细胞对RSL3抑制增殖作用最显著,RSL3抑制增殖作用与PHLPP2表达水平呈正比.上调PHLPP2表达可以增加RSL3对A549细胞增殖抑制作用,并增加铁死亡关键标志脂质ROS的累积,A549-vector和A549-PHLPP2组的脂质ROS水平分别为4.34％±0.39％和15.36％±0.80％(P＜0.001);相反,下调 PHLPP2 表达 H1650 细胞中,RSL3 对 H1650 细胞增殖抑制作用减弱,减少了其诱导的脂质ROS的累积,H1650-shControl和H1650-shPHLPP2脂质ROS水平分别为14.76％±1.22％和4.89％±1.81％(P=0.0 015).公共数据库挖掘分析PHLPP2与铁死亡关键蛋白GPX4、SLC7A11和ASCL4的相关性,发现PHLPP2与GPX4表达呈负相关(r=-0.336,P＜0.001).Western blot 进一步验证了上调 PHLPP2 表达可增强 RSL3 对 GPX4蛋白的抑制作用.[结论]PHLPP2促进GPX4抑制剂RLS3诱导铁死亡发生,其机制主要通过协同抑制GPX4活性.

关键词：非小细胞肺癌、铁死亡、PHLPP2

所属期刊栏目：28

分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：浙江省基础公益技术研究计划;台州市科技计划项目

在线出版日期：2022-08-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：459-464