10.11735/j.issn.1671-170X.2018.11.B007
人肺癌相关成纤维细胞的原代培养及其放射激活初探
[目的]探讨在体外培养条件下,不同剂量的X线照射对人肺癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)表型的影响.[方法]用经组织块贴壁法从手术标本中提取人肺癌CAFs并原代培养.使用OGy、4Gy、8Gy、12Gy、16Gy的不同剂量X线照射CAFs,通过Western blot、qRT-PCR检测其平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)、成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)、平足蛋白(podoplanin,PDPN)的蛋白和RNA水平:使用CCK8、划痕实验及流式细胞术检测细胞增殖和迁移及凋亡情况.[结果]与其他组比较.8Gy照射组的人肺CAFs中α-SMA、Vimentin、FAP、PDPN在蛋白和RNA水平表达更高.划痕实验提示8Gy照射组在48h首先愈合.CCK8研究提示该组细胞增殖活性明显高于其他照射组;流式细胞术显示照射后该组细胞凋亡率为37%,与OGy组(36%)接近,明显低于其他照射剂量组.[结论]经过一定剂量的X线照射后,人肺CAFs可表达更高水平的标志蛋白、同时表现出更强的生长和迁移能力,而该表型变化在8Gy照射组最为显著,为将来深入探讨CAFs的放射激活机制奠定基础.
人、癌相关成纤维细胞、原代培养、放射、活化
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R734.2(肿瘤学)
国家自然科学基金81670123,3080190,81372441
2018-12-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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