人抑癌基因FHIT真核表达质粒的构建与鉴定

摘要：

[目的]构建人抑癌基因FHIT真核细胞表达载体.[方法]采用PCR方法,从人胎脑组织的总cDNA中扩增出444bp的人FHIT cDNA片段,然后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1/mye-His(-)B中,用限制性内切酶EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切后酶切分析和DNA序列分析鉴定重组质粒;用该表达质粒转染COS-7细胞,Western blot法检测FHIT蛋白的表达情况.[结果]人FHIT基因cDNA以正确方向插入到真核细胞表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)B中;转染COS-7细胞后,可见转染细胞有Fhit蛋白的表达.[结论]本实验成功地构建了人抑癌基因FHIT的真核表达质粒peDNA3.1/myc-His(-)B-FHIT,为研究FHIT基因在肿瘤的发生中的作用提供了有效的工具.

关键词：基因、肿瘤抑制、FHIT基因、遗传载体

所属期刊栏目：14

分类号：R394.3

在线出版日期：2008-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：307-309