海藻糖和胎牛血清对人乳腺细胞HBL-100低温保存的影响

摘要：

建立高质量的生物样本库至关重要,低温保存过程中保护剂的种类和浓度对样本的冷冻效果有很大影响.本文以人乳腺细胞HBL-100为研究对象,在Me2SO含量10%的DMEM溶液中分别添加不同浓度海藻糖(0~0.3 mol/L)和不同体积分数FBS(20%~60%).采用逐步降温法,先在-80℃冰箱中慢速降温4 h,再快速投入到液氮中(-196℃),冻存7 d后,在37℃水浴锅中快速摇晃复温.分别用台盼蓝法、CCK法和24 h贴壁率法检测细胞的成活率,结果表明:与对照组相比,海藻糖和FBS对细胞的冷冻效果都有显著影响.当海藻糖浓度一定时,FBS体积分数越高,细胞的冷冻效果越好,但不添加海藻糖时,FBS的作用不明显;当FBS体积分数一定时,三种检测指标在海藻糖浓度为0.2 mol/L时最优,且高浓度海藻糖可能会抑制FBS作用.考虑成本等因素,最适宜冻存人乳腺细胞HBL-100的冻存液为10%Me2 SO+40%~60%FBS+0.2 mol/L海藻糖.

关键词：低温保存、存活率、海藻糖、胎牛血清

所属期刊栏目：38

分类号：R318.52;TB61+1(医用一般科学)

资助基金：国家自然科学基金 50576059 资助项目.The project was supported by the National Natural Science Foundation of China 50576059

在线出版日期：2017-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：107-113