TGF-β诱导乳鼠上皮组织DNA甲基转移酶及相关miRNA表达的研究

摘要：

目的 建立大鼠(乳鼠)肠上皮组织体外培养实验体系,检测TGF-β干预后大肠组织DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,Dnmt)及相关miRNA表达的变化,研究TGF-β诱导上皮组织的相关机制.方法 取出生3天的SD大鼠大肠组织建立体外组织块培养体系,观察组织块生长的情况,再用10 ng/ml TGF-β干预组织生长,对比干预前后组织生长状况的变化,并在干预不同的时间取组织样本;HE染色观察组织结构变化,提取组织块中RNA,采用RT-PCR方法检测DNA甲基转移酶及其相关miRNA的表达水平变化.结果 TGF-β处理不同时间的组织块HE染色分析结果表明,在培养过程中,组织基本结构逐渐不能保持.对Dnmts及相关miRNA的表达水平检测结果表明,TGF-β干预组织后,Dnmts及相关miRNA的表达水平异常,相应升高或降低;在TGF-β干预过程中,使用甲基转移酶抑制剂5-Aza-dC干预24 h后,Dnmts的表达水平下降至无法检出,而此时相关miRNA的表达水平相应升高,甚至恢复至接近无TGF-β干预状态.结论 组织块培养过程中加入TGF-β干预,组织块的生长情况、Dnmts及相关miRNA的表达水平表现出异常,甲基化转移酶抑制剂能够抑制Dnmts的表达并且调节miRNA异常表达.

关键词：TGF-β、大肠癌发生、DNA甲基转移酶、miRNA

所属期刊栏目：43

分类号：R730.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81173257

在线出版日期：2016-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：169-174