Beclin 1蛋白增强三阴性乳腺癌细胞对5-Fu敏感度的研究

摘要：

目的 探讨Beclin 1蛋白与三阴性乳腺癌细胞对5-Fu敏感度的关系.方法 应用慢病毒介导pLenO-GTP-BECN1表达载体稳定转染至BT-549细胞,嘌呤霉素筛选阳性细胞,设立对照组.使用不同浓度5-Fu处理各组细胞,MTT法比较细胞对5-Fu的敏感度;流式细胞术和Hoechst33342实验检测细胞凋亡情况;Westem blot检测细胞凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-8表达情况.结果 成功构建稳定表达Beclin 1蛋白的BT-549细胞株.pLenO-GTP-BECN1组对5-Fu敏感度显著高于其他两组;5-Fu作用48 h后,pLenO-GTP-BECN1组的IC50为(3.54±0.20)μg/ml,显著低于空白载体pLenO-GTP组(14.45±1.81) μg/ml和空白组(79.40±8.34)μg/ml (F=207.902; P＜0.00).5-Fu作用前,pLenO-GTP-BECN 1组凋亡率为(12.14±0.76)％,同pLenO-GTP组(13.57±1.04)％和空白组(13.75±1.29)％(F=2.096;P=0.204)之间差异并无统计学意义;5-Fu作用48 h后,pLenO-GTP-BECN1组凋亡率为(51.01±3.26)％,显著高于pLenO-GTP组(42.17±4.6)％和空白组(38.42±2.93)％(F=9.32;P＜0.01);接受5-Fu处理后,pLenO-GTP-BECN1组细胞核凋亡特征改变较其他两组更明显.5-Fu作用后,pLenO-GTP-BECN1组细胞Caspase-3相对表达量为(0.57±0.0028),显著高于pLenO-GTP组(0.42±0.010)和空白组(0.30±0.046)(F=46.134;P＜0.01);pLenO-GTP-BECN1组细胞Caspase-8相对表达量为(0.44±0.0038),显著高于pLenO-GTP组(0.18±0.0095)和空白组(0.27±0.00060)(F=1006.757;P＜0.00).结论 Beclin 1显著提高三阴性乳腺癌细胞对5-Fu的敏感度,其中促进凋亡发生可能是重要机制之一.

关键词：Beclin 1、三阴性乳腺癌、5-氟尿嘧啶、凋亡

所属期刊栏目：42

分类号：R737.9(肿瘤学)

资助基金：广东省自然科学基金S2012010009276

在线出版日期：2015-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：436-441