10.3971/j.issn.1000-8578.2013.05.001
寡核苷酸Dbait乏氧辐射双诱导重组质粒的构建及其对人宫颈癌HeLa细胞的乏氧放射增敏效应
目的 构建携带新型放射增敏剂Dbait的乏氧辐射双诱导的重组质粒pcDNA 3.1(+)-HRE-Egr-1-Dbait,探讨乏氧条件下其对宫颈癌HeLa细胞的放射增敏作用,为Dbait的基因靶向放射增敏治疗提供实验依据.方法 从C57BL/6裸鼠肝组织扩增Egr-1启动子,人工合成HRE增强子序列和新型寡核苷酸药物Dbait,通过基因重组分别将Egr-1、HRE和Dbait克隆入pcDNA 3.1(+)中,获得重组质粒pcDNA 3.1(+)-HRE-Egr-1-Dbait.转染宫颈癌HeLa细胞,采用集落形成试验观察在常氧和乏氧状态下宫颈癌HeLa细胞的放射敏感度.结果 真核表达重组质粒pcDNA3.1(+)-HRE-Egr-1-Dbait构建成功并通过PCR和测序鉴定.在常氧情况下宫颈癌HeLa细胞的D0、Dq、SF2、α/β值分别为1.98、0.93、0.52、11.12.在乏氧情况下宫颈癌HeLa细胞的D0、Dq、SF2、α/β值分别为1.74、1.46、0.43、15.82,氧增敏比OER为0.88.结论 成功构建了携带新型放射增敏剂Dbait的乏氧辐射双诱导的真核表达质粒pcDNA 3.1(+)-HRE-Egr-1-Dbait,并验证了其在宫颈癌HeLa细胞中的乏氧辐射增敏效应.
乏氧、靶向、放射增敏、宫颈癌
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R737.33;R730.55(肿瘤学)
国家自然科学基金资助项目81071831
2013-07-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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