siRNA抑制FHL2对胃肠癌细胞β-catenin活性的影响

摘要：

目的 本研究旨在调查通过siRNA抑制FHL2表达后对β-catenin活性及其下游基因survivin表达的影响,探讨两者在肠癌发生中的协同作用.方法 (1)PCR扩增含有β-catenin作用位点、长为340bp的survivin基因启动子片段,克隆入PGL3-basic载体,构建荧光素酶报告质粒pluc340.(2)脂质体瞬时转染法将β-catenin活性报告质粒pTOPFLASH、pFOPFLASH和pluc340转染入胃肠癌及正常细胞株,双荧光素酶法测定其启动子活性,并评价其对fhl2 siRNA的反应.(3)RT-PCR方法检测基因表达.结果 成功构建了survivin启动子片段pluc340;荧光素酶活性检测显示:β-catenin转录活性在胃肠癌细胞明显高于正常细胞;siRNA抑制FHL2表达后,β-catenin转录活性下降,survivin表达降低.结论 抑制FHL2的表达能够降低β-catenin转录活性及下游癌基因的表达,干扰Wnt信号通路,说明fhl2有望成为肠癌治疗的新靶点.

关键词：fhl2、β-catenin、survivin、肠癌

所属期刊栏目：37

分类号：R735.2;R735.3(肿瘤学)

在线出版日期：2010-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：992-995