siRNA对人食管癌EC9706细胞真核起始因子4E表达的影响

摘要：

目的 探讨siRNA对人食管癌EC9706细胞中eIF4E表达的影响.方法 针对GeneBank中eIF4E基因的不同靶点,设计并合成两条特异siRNA及一条无义siRNA寡核苷酸模板,利用体外转录法合成siRNA,在脂质体介导下以150 ng/μl、200 ng/μl和250 ng/μl三种浓度转染EC9706细胞,分别培养24 h、48 h、72 h,同时设正常对照组.采用免疫细胞化学及原位杂交技术检测转染前后EC9706细胞中eIF4E蛋白和mRNA的表达;应用流式细胞技术检测转染前后EC9706细胞周期的变化情况.结果 转染siRNA后细胞形态发生明显改变.不同浓度的两条特异siRNA转染细胞后,eIF4E蛋白及mRNA表达量均较正常对照组降低,并且具有显著的剂量依赖性(P<0.05),但两转染组之间相比,差异无统计学意义(P>0.05);无义siRNA未表现出对eIF4E基因表达的抑制效应(P>0.05);两条特异siRNA转染组与无义siRNA转染组相比,差异有统计学意义(P<0.05).三种不同浓度siRNA转染细胞72h后与无义转染组及正常对照组相比,G_0/G_1期细胞比例显著增加,S期细胞比例相对减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论 特异性siRNA能有效抑制人食管癌EC9706细胞中eIF4E基因的表达;抑制细胞增殖.

关键词：RNA干扰、真核起始因子4E、食管肿瘤、EC9706细胞

所属期刊栏目：36

分类号：R735.1(肿瘤学)

资助基金：河南省杰出青年科学基金074100510009;河南省科技攻关计划082102310011

在线出版日期：2010-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1003-1007