精胺/精眯N1-乙酰基转移酶重组蛋白的原核表达及其抗体制备

摘要：

目的 探讨精胺/精眯N1乙酰基转移酶(SSAT)的原核表达及抗SSAT多克隆抗体的制备.方法 RT-PCR法从人肺癌细胞总RNA中克隆SSAT cDNA后,构建SSAT原核表达质粒pET15b/SSAT并转化BL21(DE3)大肠杆茵细胞.SSAT重组蛋白经IPTG诱导表达后,利用PAGE凝胶纯化和Ni-NTA亲和层析纯化.用凝胶纯化的SSAT重组蛋白免疫家兔以制备抗SSAT多克隆抗体,所得抗体的特异性及效价用Western blot和ELISA技术检测.结果 SSAT重组蛋白可在大肠杆茵中诱导性高表达,用此蛋白免疫动物所得的SSAT抗体的效价以及特异性均较高.结论 建立了SSAT原核表达系统并成功制备出SSAT多克隆抗体.

关键词：SSAT、原核表达、抗体

所属期刊栏目：36

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30772590

在线出版日期：2009-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：475-479