辛伐他汀联合贝伐珠单抗通过HIF-1α-Wnt/β-catenin通路抑制肺腺癌A549细胞的增殖、迁移及侵袭并促进其凋亡

摘要：

目的:研究辛伐他汀(simvastatin,Sim)联合贝伐珠单抗(bevacizumab,Beva)对人肺腺癌A549 细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响,及可能的作用机制.方法:采用CCK-8 法和平板克隆形成实验检测不同浓度的Sim(4、8、12、16 和 20 μmol/L)和Beva(1、2、4、5 和 6 mg/mL)单药或 2 药联合对A549 细胞增殖的影响,并计算Beva的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)以及联合用药指数(combination index,CI).分别采用划痕愈合实验、Transwell小室实验和FCM法检测Sim单药、Beva单药以及 2 药联合处理对A549 细胞迁移、侵袭及凋亡的影响,应用实时荧光定量PCR法检测不同处理对A549 细胞内缺氧诱导因子 1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)mRNA表达水平的影响,用蛋白质印迹法检测不同处理对A549 细胞内增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、迁移和侵袭相关蛋白[基质金属蛋白酶 9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和波形蛋白(vimentin)]、凋亡相关蛋白(Bax和Bcl-2)以及HIF-1α和β-连环蛋白(β-catenin)表达水平的影响.结果:不同浓度的Sim单药、Beva单药及 2 药联合处理后,均可抑制A549细胞的增殖(P＜0.05),Beva在24和48 h时的IC50 值分别为(5.272±0.345)mg/mL和(3.434±0.312)mg/mL,2 药联合的CI值均＜1,表现为协同效应.Sim联合Beva组A549 细胞的克隆形成数、迁移及侵袭能力均明显低于对照组和各单药组(P＜0.05),且 2 药联合处理组细胞中PCNA、MMP-9和vimentin蛋白的表达水平明显低于对照组和各单药组(P＜0.05).Sim单药浓度为 8 μmol/L时对A549 细胞无明显的促凋亡作用(P＞0.05),但联合Beva可增加Beva的促凋亡作用,且可上调促凋亡蛋白Bax的表达水平,下调抗凋亡蛋白Bcl-2 的表达水平(P＜0.05).与对照组相比,Beva作用于A549 细胞后HIF-1α mRNA和蛋白以及β-catenin蛋白的表达水平均明显增高,而Sim作用后其表达水平均明显降低(P＜0.05);与Beva单药组相比,2 药联合处理后A549 细胞中的HIF-1α mRNA和蛋白以及β-catenin蛋白表达水平明显下调(P＜0.05).结论:Sim联合Beva可协同抑制肺腺癌A549 细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进其凋亡;其机制可能与Sim可削弱Beva诱导的HIF-1α表达升高,进而负向调控HIF-1α-Wnt/β-catenin信号通路相关.

关键词：肺腺癌、辛伐他汀、贝伐珠单抗、细胞增殖、细胞凋亡

所属期刊栏目：42

分类号：R734.2;R285.5;R965

在线出版日期：2023-06-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：229-240