沉默ACSL1表达抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的脂肪代谢及增殖和迁移

摘要：

目的:研究抑制长链脂酰辅酶A合成酶 1(long-chain acyl-CoA synthetase 1,ACSL1)表达对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)细胞脂肪代谢的影响,并探讨其抑制TNBC细胞增殖和迁移等恶性表型的作用.方法:利用癌症基因图谱(Te Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库探究并分析ACSL1 与乳腺癌预后的相关性,并对比不同乳腺癌亚型中ACSL1 表达量的差异.在供给棕榈酸(palmitic acid,PA)的条件下培养TNBC型MDA-MB-231 细胞和雌激素受体阳性的乳腺癌MCF-7 细胞,并采用ATP生物发光法检测PA对细胞ATP产量的影响,以评估不同亚型乳腺癌细胞对脂肪酸代谢的偏好;同时采用CCK-8 法检测PA对细胞活性的影响.为评估抑制ACSL1 表达对TNBC型MDA-MB-231 细胞脂肪酸代谢的影响,采用慢病毒感染的方法在MDA-MB-231 细胞中沉默ACSL1的表达,随后采用蛋白质印迹法检测细胞中脂肪酸代谢相关蛋白ACSL1、肉毒碱棕榈酰转移酶 1A(carnitine palmitoyltransferase 1A,CPT1A)以及白细胞分化抗原CD36 的表达水平;采用BODIPY脂肪荧光染色法检测细胞内的脂肪积累情况,采用划痕愈合实验检测细胞的迁移能力,CCK-8 法和克隆形成实验检测细胞的增殖能力.结果:ACSL1 高表达的乳腺癌患者的生存率明显低于ACSL1 低表达者(P= 0.000 14),且HER2 过表达型和TNBC型患者中ACSL1 的表达水平均高于Luminal A和(或)B型患者(P均＜0.001).在给予PA处理后,MDA-MB-231 细胞中相对ATP产量及细胞活性均较未用PA处理的细胞明显提高(P均＜0.05),而对MCF-7 细胞中ATP产量及细胞活性则无明显影响(P均＞0.05).在MDA-MB-231 细胞中沉默ACSL1 表达后,细胞中脂肪酸代谢相关蛋白ACSL1、CPT1A以及CD36 的表达水平下调,细胞内脂滴积累及脂肪含量降低,细胞迁移能力降低(P＜0.001),细胞增殖能力减弱(P＜0.05).结论:ACSL1 高表达与乳腺癌的不良预后相关.在各乳腺癌亚型中,TNBC患者具有相对较高的ACSL1 表达水平.对于具有脂肪酸代谢偏好的TNBC细胞MDA-MB-231,沉默其ACSL1 表达可抑制其脂肪酸代谢,并降低其细胞迁移和增殖能力.

关键词：乳腺肿瘤、脂肪酸代谢、长链脂酰辅酶A合成酶1、细胞增殖、细胞运动

所属期刊栏目：42

分类号：R737.9;B842.6;R395.6

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2023-06-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：133-143