血清外泌体vWF含量及活性对弥漫大B细胞淋巴瘤患者预后的影响

摘要：

目的:探讨血清外泌体中血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)含量及活性与弥漫大B细胞淋巴瘤(difuse large b-cell lymphoma,DLBCL)患者预后的相关性.方法:应用商品化试剂盒(from serum)分离DLBCL患者血清外泌体,蛋白质印迹法检测外泌体标志蛋白CD63、CD9和肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene 101,TSG101)的表达水平,透射电子显微镜下观察外泌体的形态和大小,纳米粒径分析仪Zetasizer检测外泌体的粒径分布.应用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清及血清外泌体中vWF的表达量,免疫比浊法检测外泌体中vWF的活性,免疫组织化学检测不同分期患者组织标本中vWF蛋白的表达水平.采用Kaplan-Meier法分析患者血清外泌体vWF含量及活性对总生存期(overall survival,OS)及无进展生存期(progression-free survival,PFS)的影响.绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线并计算曲线下面积(area under the curve,AUC)分析血清外泌体vWF含量及活性对患者预后的预测价值.结果:蛋白质印迹法结果显示,提取的血清外泌体表达外泌体标志蛋白CD63、CD9和TSG101,而不表达细胞蛋白Calnexin;透射电子显微镜结果显示,外泌体呈典型的茶托样结构;Zetasizer粒径分析结果显示,外泌体粒径为30～150 nm.DLBCL患者的分期越晚,血清vWF含量越高(P=0.0163);血清外泌体中vWF含量及活性与患者的分期、国际预后指数(international prognostic index,IPI)评分及预后均相关;分期晚(Ⅲ+Ⅳ期)和IPI评分高(3～5),DLBCL患者的血清外泌体vWF含量越高(P=0.0008和P=0.0049),活性也越大(P=0.0176和P=0.0069).生存分析显示,血清外泌体vWF含量及活性越大,DLBCL患者的OS率(P=0.0038和P<0.0001)及PFS率(P=0.0387和P=0.0076)越低.ROC曲线分析提示,外泌体vWF含量及活性对DLBCL患者OS(AUC=0.7739和AUC=0.7318)及PFS(AUC=0.9231和AUC=0.8200)的预测价值大,甚至优于IPI评分(AUC=0.8008和AUC=0.8415).结论:血清外泌体vWF含量及活性在高危DLBCL患者中增高,并能显著区分患者OS与PFS,提示其可作为DLBCL的一种潜在预后标志物.

关键词：弥漫大B细胞淋巴瘤、外泌体、血管性血友病因子、预后

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资助基金：国家自然科学基金;上海交通大学医学院附属仁济医院临床科研创新培育基金计划

在线出版日期：2022-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：371-382