比卡鲁胺通过下调PKC的表达水平抑制三阴性乳腺癌BT549细胞的增殖和侵袭

摘要：

目的:探讨雄激素受体(androgen receptor,AR)拮抗剂比卡鲁胺(bicalutamide)对AR阳性的三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)型BT549细胞的生物学功能的影响及可能的分子机制.方法:采用蛋白质印迹法筛选AR高表达的TNBC细胞株;CCK-8法检测不同浓度比卡鲁胺对BT549细胞增殖的抑制作用,并计算半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50), 以等体积的DMSO处理BT549细胞作为对照组.采用比卡鲁胺(150 μmol/L)处理BT549细胞后,蛋白质印迹法检测比卡鲁胺对BT549细胞中AR表达水平的影响;FCM法检测对BT549细胞凋亡和细胞周期的影响,Transwell小室法检测对BT549细胞迁移及侵袭能力的影响;最后,再用蛋白印迹法检测细胞中E-上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)、基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinases 3,MMP3)、细胞外信号调节激酶1/2 (extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)及其磷酸化ERK1/2 (phospho-ERK1/2,p-ERK1/2)蛋白的表达水平.结果:筛选AR高表达的TNBC细胞株BT549为研究对象;不同浓度比卡鲁胺(20、40、80和160 μmol/L)均能抑制BT549细胞的增殖(P值均＜ 0.01),比卡鲁胺对BT549细胞的IC50值为143.9 μmol/L.用比卡鲁胺(150 μmol/L)处理BT549细胞24 h后,与对照组相比,比卡鲁胺能明显抑制BT549细胞中AR蛋白的表达水平(P＜0.01),并诱导BT549细胞发生凋亡(P＜0.01),但对细胞周期无明显影响.比卡鲁胺明显抑制BT549细胞的迁移及侵袭能力(P＜0.001和P＜0.01);上调E-cadherin蛋白的表达水平,下调Vimentin、 PKC、MMP3、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白的表达水平(P值均＜0.05).结论:AR拮抗剂比卡鲁胺可抑制AR高表达TNBC型BT549细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并诱导其凋亡.PKC可能是比卡鲁胺调控BT549细胞增殖和侵袭的关键分子.

关键词：乳腺肿瘤、雄激素受体拮抗剂、细胞增殖、细胞凋亡、细胞运动

所属期刊栏目：40

分类号：R737.9(肿瘤学)

资助基金：1.四川省科技厅国际合作项目编号:18GJHZ0249.2.泸州-西南医大联合项目编号:2017LZXNYD-J11

在线出版日期：2020-10-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：614-624