Let-7a对尤文肉瘤干细胞恶性表型的影响及其可能的机制

摘要：

目的:探讨微RNA let-7a对尤文肉瘤中肿瘤干细胞恶性表型的影响及其可能的分子作用机制.方法:采用侧群(side population,SP)细胞分选法分选出尤文肉瘤A673和SK-ES-1细胞中的肿瘤干细胞样细胞,并进行鉴定.采用实时荧光定量PCR法检测SP细胞与非SP (non-SP)细胞中let-7a的表达差异.将人工合成的let-7a模拟物(let-7a mimic)分别转染至A673和SK-ES-1的SP细胞中,随后通过细胞集落形成实验和Transwell小室侵袭实验分别检测let-7a对SP细胞集落形成和侵袭能力的影响.蛋白质印迹法检测SP细胞和non-SP细胞中信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)及其下游的磷酸化STAT3(phospho-STAT3,p-STAT3)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)蛋白的表达差异,以及转染let-7a mimic后SP细胞中这些蛋白表达水平的变化.结果:成功分离出尤文肉瘤A673和SK-ES-1细胞中的肿瘤干细胞样SP细胞,并发现SP细胞中干细胞相关蛋白SOX2和CD133的表达水平均明显上调(P值均＜ 0.01).与non-SP细胞相比,SP细胞中let-7a呈低表达(P＜0.01),而STAT3信号通路相关蛋白STAT3、p-STAT3和MMP2明显高表达(P值均＜0.01),细胞集落形成能力和侵袭能力均明显升高(P值均＜ 0.05).let-7a过表达的尤文肉瘤SP细胞中,细胞集落形成能力和侵袭能力均较阴性对照组明显降低(P值均＜ 0.05),而且STAT3及其下游p-STAT3和MMP2蛋白表达水平较阴性对照组均明显下调(P值均＜0.01).结论:尤文肉瘤干细胞中Let-7a低表达.过表达let-7a可能通过STAT3信号通路介导抑制尤文肉瘤干细胞的集落形成和侵袭能力.

关键词：肉瘤、Ewing、微RNAs、肿瘤干细胞、Let-7a、信号转导与转录激活因子3

所属期刊栏目：40

分类号：R730.262(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2020-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：453-462