SOX2通过下调CD20表达水平诱导弥漫大B细胞淋巴瘤细胞对利妥昔单抗产生耐药

摘要：

目的:探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)在利妥昔单抗(rituximab)联合CHOP方案[环磷酰胺(cyclophosphamide)+多柔比星(doxorubicin)+长春新碱(oncovin/vincristin)+强的松(prednisone)](简称为R-CHOP方案)治疗中对利妥昔单抗产生耐药的分子机制.方法:选取2株DLBCL细胞,生发中心B细胞亚型(germinal center B-cell-like,GCB) OCI-LY8 (LY8)和活化的B细胞亚型(activated B-cell-1ike,ABC) NU-DUL-1细胞.采用FCM法检测亲本LY8和NU-DUL-1细胞,以及耐药细胞株LY8-R、LY8-CHO、LY8-RCHO、NU-DUL-1-R、NU-DUL-1-CHO和NU-DUL-1-RCHO中CD20和3种补体膜调控蛋白CD46、CD55和CD59的表达水平;应用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法检测CD20蛋白和mRNA的表达水平.收集SRY(性别决定区Y)-框转录因子2 [SRY (sex determining region Y)-box 2,SOX2]过表达的亲本LY8和NU-DUL-1细胞和沉默SOX2表达的耐药LY8-RCHO和NU-DUL-1-RCHO细胞,再用FCM法观察CD20、CD46、CD55及CD59的表达水平.采用免疫组织化学法检测25例至少接受过6次R-CHOP方案治疗无效的DLBCL患者治疗前后的肿瘤组织中CD20与SOX2的表达水平.结果:与亲本细胞相比,在发生利妥昔单抗耐药的LY8-R、LY8-RCHO以及NU-DUL-1-R、NU-DUL-1-RCHO细胞株中膜蛋白CD20的表达水平均明显降低(P值均＜ 0.001),仅对化疗药物CHO耐药的LY8-CHO与NU-DUL-1-CHO细胞株中膜蛋白CD20的表达水平无明显变化,补体膜调控蛋白CD46、CD55和CD59的表达水平均被下调(P值均＜0.05).蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法证实,CD20蛋白和mRNA的表达水平均明显降低(P值均＜ 0.01和P值均＜0.001).亲本LY8和NU-DUL-1细胞中,过表达SOX2能明显降低CD20的表达水平(P值均＜0.000 1),而在LY8-RCHO和NU-DUL-1-RCHO细胞中沉默SOX2表达后,CD20的表达水平明显上调(P值均＜ 0.000 1).免疫组织化学法检测结果提示,DLBCL患者经R-CHOP治疗后肿瘤组织中CD20的表达水平相对于治疗前明显下降(P＜0.01),而SOX2的表达水平相对于治疗前明显升高(P＜0.001),肿瘤组织中CD20与SOX2表达呈负相关性(r2=0.523 3,P＜0.000 1).结论:SOX2通过下调CD20的表达水平,诱导DLBCL细胞对利妥昔单抗治疗产生耐药.

关键词：淋巴瘤、大B细胞、弥漫性、抗原、CD20、SOX2基因、利妥昔单抗、抗药性、肿瘤

所属期刊栏目：40

分类号：R733.4(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;上海市临床重点专科资助项目

在线出版日期：2020-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：317-328