TPX2通过PI3K/Akt信号通路调控肝癌细胞增殖及凋亡

摘要：

目的:探讨爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白(targeting protein for Xenopus kinesin-like protein 2,TPX2)在肝癌细胞中表达及对肝癌细胞增殖和凋亡的调控作用,以及可能的作用机制.方法:应用实时荧光定量PCR法及蛋白质印迹法分别检测正常肝细胞L-02及肝癌Huh7、Hep3B、HepG2和MHCC97-H细胞中TPX2 mRNA及蛋白表达.将靶向TPX2的重组质粒pMagic4.1-shRNA-TPX2分别转染肝癌Huh7和Hep3B细胞后,应用MTT法检测肝癌细胞的增殖能力,FCM法检测肝癌细胞周期及细胞凋亡率.应用实时荧光定量PCR法检测靶向沉默TPX2后,肝癌细胞中TPX2、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称Akt)、p21、Bcl-2、c-Myc和Cyclin D1 mRNA表达,及蛋白质印迹法检测TPX2、PI3K、磷酸化-Akt(phosphorylation-Akt,p-Akt)、Akt、p21和Bcl-2蛋白表达.结果:肝癌Huh7、Hep3B、HepG2和MHCC97-H细胞中TPX2 mRNA及蛋白表达水平均明显高于正常肝细胞L-02 (P值均＜0.01).重组质粒pMagic4.1-shRNA-TPX2成功转染后,肝癌Huh7和Hep3B细胞中TPX2mRNA及蛋白表达水平均明显下调(P值均＜0.01).靶向沉默TPX2后,Huh7和Hep3B细胞增殖能力均明显下降(P值均＜0.01),细胞周期被阻滞于G0/G1期(P值均＜0.01),细胞凋亡率明显增加(P值均＜0.01);Huh7和Hep3B细胞中PI3K、Bcl-2、c-Myc和Cyclin D1 mRNA表达水平明显下调(P值均＜ 0.05),PI3K、p-Akt和Bcl-2蛋白表达水平明显下调(P值均＜ 0.05),p21 mRNA及蛋白表达水平均明显上调(P值均＜0.01).结论:TPX2通过PI3K/Akt信号通路调控肝癌细胞增殖及凋亡,有望成为肝癌治疗的潜在靶点.

关键词：肝肿瘤、细胞增殖、细胞凋亡、PI3K/Akt信号通路、TPX2

所属期刊栏目：39

分类号：R735.7(肿瘤学)

在线出版日期：2019-12-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：897-907