Sestrin2促进胃癌细胞生长并提高其耐药性

摘要：

目的:探讨Sestrin 2(Sesn2)对胃癌细胞生长活性、凋亡以及耐药性的影响及其可能的分子机制.方法:应用蛋白质印迹法检测正常胃黏膜细胞GES-1、胃癌细胞SGC7901和耐多柔比星(adriamycin,ADR)胃癌细胞SGC7901/ADR中Sesn2蛋白的表达.将SGC7901和SGC7901/ADR细胞分为3组:空白对照组(blankcontrol,BC,细胞不进行转染)、阴性对照组[细胞转染siRNA-NC(si-NC)]和Sesn2沉默组[细胞转染siRNA-Sesn2 (si-Sesn2)].按分组处理细胞后,应用MTT法检测细胞活性,FCM法检测细胞凋亡率,ELISA法检测细胞中caspase 3/9的活性,应用MTT法检测ADR、顺铂(diammine dichloro platinum,DDP)和5-氟脲嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)值,蛋白质印迹法检测细胞中多药耐药蛋白1 (multidrug resistance protein 1,MDR1)和多药耐药相关蛋白1 (multidrug resistance-associated protein 1,MRP1)、核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)和血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)的表达.将SGC7901/ADR细胞分成3组:BC组(细胞不进行转染)、阴性对照组(细胞转染si-NC)和Nrf2沉默组[细胞转染siRNA-Nrf2 (si-Nrf2)].按分组处理细胞后,应用MTT法检测细胞活性,FCM法检测细胞凋亡率,ELISA法检测细胞中caspase 3/9的活性,MTT法检测ADR、DDP和5-FU对细胞的IC50值,蛋白质印迹法检测细胞中MDR1、MRP1、Nrf2和HO-1蛋白的表达.结果:与GES-1细胞相比,SGC7901和SGC7901/ADR细胞中Sesn2的表达水平显著上升(P值均＜ 0.05).转染si-Sesn2后,SGC7901和SGC7901/ADR细胞活性均显著降低(P值均＜0.05),细胞凋亡率均显著升高(P值均＜ 0.05),caspase 3/9活性均上升(P值均＜0.05),ADR、DDP和5-FU对SGC7901/ADR细胞的IC50值显著降低(P值均＜0.05),MDR1、MRP1、HO-1和细胞核Nrf2蛋白表达水平均明显降低(p值均＜0.05).将si-Nrf2转染SGC7901/ADR细胞后,细胞活性降低,细胞凋亡率上升,caspase 3/9活性上升,ADR、DDP和5-FU对SGC7901/ADR细胞的IC50值显著降低(P值均＜0.05),MDR1、MRP1、Nrf2和HO-1表达水平均降低(P值均＜ 0.05).结论:Sesn2可能通过激活Nrf2/HO-1通路,促进胃癌细胞生长并提高其耐药性.

关键词：胃肿瘤、抗药性、多药、细胞增殖、细胞凋亡、Sestrin2

所属期刊栏目：39

分类号：R735.2(肿瘤学)

在线出版日期：2019-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：795-803,812