溴隐亭促进大鼠泌乳素瘤MMQ细胞分泌外泌体以及对细胞耐药性的影响

摘要：

目的:探讨溴隐亭在促进大鼠泌乳素瘤MMQ细胞分泌外泌体,及其外泌体在MMQ细胞耐药中的作用.方法:采用CCK-8法检测不同浓度的溴隐亭对MMQ细胞增殖的影响,并计算半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值.MMQ细胞在溴隐亭中暴露48 h后,采用差速离心法分离收集外泌体;在透射电子显微镜下观察外泌体形态和大小,纳米颗粒跟踪分析仪检测外泌体粒径,蛋白质印迹法检测外泌体表面标志物CD63的表达情况.用PKH67标记外泌体,在激光共聚焦显微镜下观察外泌体被MMQ细胞摄取的情况;采用CCK-8法检测外泌体被摄取后,MMQ细胞对溴隐亭敏感性的改变.实时荧光定量PCR法检测外泌体处理后对MMQ细胞中PR结构域锌指蛋白2(PR domain zinc finger protein 2,PRDM2)mRNA表达的影响;蛋白质印迹法检测外泌体处理后对MMQ细胞中PRDM2、多巴胺2受体(dopamine 2 receptor,D2R)和细胞外信号调节激酶1/2(extracelMar signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)以及磷酸化ERK1/2(phospho-ERK1/2,p-ERK1/2)表达水平的影响.结果:溴隐亭对MMQ细胞的IC50值为(52.91±1.48) μmol/L;与未用溴隐亭处理的MMQ细胞所分泌的外泌体相比,溴隐亭处理MMQ细胞所分泌的外泌体颗粒数和蛋白质含量均显著增加(P值均＜ 0.01),但粒径没有变化.与MMQ细胞相比,仅有外泌体上有CD63的表达.溴隐亭处理MMQ细胞所分泌的外泌体可以被MMQ细胞所摄取;MMQ细胞摄取外泌体后,溴隐亭对MMQ细胞的IC50值为(73.74±1.17) μmol/L,较未摄取外泌体的MMQ细胞明显提高(P＜ 0.01);MMQ细胞摄取外泌体后,MMQ细胞中PRDM2 mRNA和蛋白的表达水平明显下调(P值均＜0.05),D2R蛋白的表达水平也明显降低(P＜0.05),p-ERK1/2蛋白的表达水平升高(P＜0.05).结论:溴隐亭可促进大鼠泌乳素瘤MMQ细胞分泌外泌体,并且在溴隐亭治疗时所产生的外泌体可通过在肿瘤细胞间传递信息,从而使MMQ细胞获得耐药性.

关键词：催乳素瘤、外泌体、溴隐亭、细胞增殖、抗药性、肿瘤

所属期刊栏目：39

分类号：R736.4(肿瘤学)

在线出版日期：2019-09-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：515-524