激活趋化因子CXCL5可诱发非肌层浸润性膀胱癌对灌注化疗耐药

摘要：

目的:探讨非肌层浸润性膀胱癌(non-muscle invasive bladder cancer,NMIBC)对灌注化疗药物耐药的分子机制.方法:首先用丝裂霉素C (mitomycin C,MMC)反复刺激膀胱癌RT4细胞株,诱导出膀胱癌耐药细胞株M-RT4;采用CCK-8法和划痕愈合实验分别验证M-RT4细胞的耐药性及迁移能力;同时采用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测RT4细胞、M-RT4细胞及复发性NMIBC组织标本中CXC趋化因子配体5(CXC chemokine ligand 5,CXCL5)的表达水平.用重组人CXCL5 (recombinant human CXCL5,rhCXCL5)处理RT4细胞后,观察细胞对MMC的敏感性变化.利用siRNA敲减耐药细胞M-RT4中CXCL5的表达后,采用CCK-8法检测细胞耐药性的改变,同时采用蛋白质印迹法检测膀胱癌细胞耐药过程中上皮-间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)通路相关分子如E-钙黏蛋白(E-cadherin)、细胞角蛋白7(cytokeratin-7,Cyt-7)、Claudin-1、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和Snail,以及核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)通路相关分子如NF-κB1、Rel A、NF-κB2及Rel B的表达情况.结果:与RT4细胞相比,诱导获得的M-RT4细胞对MMC的耐药性明显增强(P＜0.01),同时还具有更强的增殖和迁移能力(P＜0.05,P＜0.01).复发性NMIBC患者的肿瘤组织中CXCL5 mRNA高表达(P＜0.000 1),耐药性膀胱癌M-RT4细胞中CXCL5 mRNA和蛋白J表达均明显高于RT4细胞(P值均＜ 0.01).在RT4细胞中,加入rhCXCL5处理后细胞对MMC的敏感性降低(P＜0.01);相反在M-RT4细胞中,敲减CXCL5表达后细胞对MMC的敏感性增强(P＜0.01).与RT4细胞相比,M-RT4细胞中E-cadherin、Cyt-7及Claudin-1表达水平明显下调(P值均＜0.01),而N-cadherin、Vimentin、NF-κB1、Rel A、NF-κB2及Rel B蛋白表达水平明显上调(P值均＜ 0.05).rhCXCL5处理可上调RT4细胞中Snail、NF-κB1、Rel A和Rel B的表达(P值均＜0.05);敲减M-RT4细胞中中CXCL5表达可以抑制Snail激活(P＜0.05),增强Cyt-7表达(P＜0.01),同J时降低NF-κB1、Rel A和Rel B的表达水平(p值均＜0.05).结论:NMIBC组织和膀胱癌耐药细胞中CXCL5 高表达.敲低CXCL5表达可通过逆转EMT来降低耐药细胞对MMC的耐药性,提示CXCL5足导致NMIBC对灌注化疗药物耐药的重要影响[因子.

关键词：膀胱肿瘤、抗药性、肿瘤、趋化因子CXCL5、基因表达调控、上皮-间质转化

所属期刊栏目：39

分类号：R737.14(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;北京市医院管理局青年人才培养青苗计划

在线出版日期：2019-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：335-345