Drosha通过调控微RNA-195-5P促进胃癌细胞的迁移和侵袭

摘要：

目的:探讨Drosha对胃癌MGC-803和SGC-7901细胞迁移和侵袭能力的影响及其可能的作用机制.方法:将携带有Drosha-shRNA的重组慢病毒感染胃癌MGC-803和SGC-7901细胞,以感染携带有阴性对照(negative control,NC)-shRNA的重组慢病毒作为对照.采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测转入Drosha-shRNA后对MGC-803和SGC-7901细胞中Drosha mRNA和蛋白表达的影响,Transwell小室迁移和侵袭实验分别检测Drosha下调对MGC-803和SGC-7901细胞迁移和侵袭能力的影响;实时荧光定量PCR检测Drosha下调的MGC-803和SGC-7901细胞中微RNA-195-5P(microRNA-195-5P,miR-195-5P)的表达水平.在Drosha下调的胃癌细胞中采用脂质体法同时转入miR-195-5P-inhibitor,实时荧光定量PCR检测miR-195-5P的下调效果,Transwell小室迁移和侵袭实验分别检测下调miR-195-5P表达对细胞迁移和侵袭能力的影响.采用脂质体法将miR-195-5P-mimics转染MGC-803和SGC-7901细胞,实时荧光定量PCR检测miR-195-5P过表达的效果,Transwell小室迁移和侵袭实验分别检测miR-195-5P过表达对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响.结果:感染Drosha-shRNA重组慢病毒后,MGC-803和SGC-7901细胞中Drosha mRNA和蛋白表达水平均较对照组明显下调(P值均＜0.01),细胞的迁移和侵袭能力均明显被抑制(P值均＜ 0.05),miR-195-5P的表达水平明显上调(P值均＜ 0.001).成功在Drosha下调的胃癌MGC-803和SGC-7901细胞中下调miR-195-5P的表达水平(P值均＜0.05),miR-195-5P表达下调可以恢复Drosha下调对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响(P值均＜0.05).成功将miR-195-5P-mimics瞬时转入MGC-803和SGC-7901细胞,MGC-803和SGC-7901细胞中miRNA-195-5P的表达水平明显上调(P值均＜ 0.01),细胞的迁移和侵袭能力均明显降低(P值均＜0.01).结论:Drosha可促进胃癌细胞的迁移和侵袭能力.Drosha与miR-195-5P的表达呈负相关性,Drosha通过调控miR-195-5P的表达促进胃癌细胞的迁移和侵袭.

关键词：胃肿瘤、细胞运动、基因表达、Drosha、微RNA-195-5P

所属期刊栏目：38

分类号：R735.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2018-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：925-932