真核翻译延伸因子1A1通过调控cyclin D2表达促进肝癌细胞增殖

摘要：

目的:研究真核翻译延伸因子1A1 (eukaryotic translation elongation factor 1A1,eEF1A1)表达对原发性肝癌细胞周期和增殖的影响,并探讨其分子机制.方法:免疫组织化学法检测101例肝癌及癌旁组织中eEF1A1的表达水平,并进一步分析肝癌组织中eEF1A1表达与肝癌患者临床病理参数的相关性.采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测肝癌细胞Huh7、SMMC7721、MHCC97H、Hep3B和正常肝细胞HL-7702中eEF1A1mRNA和蛋白的表达水平.在肝癌Huh7和SMMC7721细胞中分别转染特异性针对eEF1A1基因的shRNA-1/2(即eEF1A1-shRNA-1/2)和过表达质粒pcDNA3.1-eEF1A1,并采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法验证eEF1A1表达的变化,然后采用EdU法和FCM法分别检测肝癌细胞增殖和细胞周期的变化.另外,蛋白质印迹法检测转染eEF1A1 shRNA-1/2的肝癌Huh7细胞和转染pcDNA3.1-eEF1A1的SMMC7721细胞中cyclin D2以及信号转导与转录激活子1(signal transducer and activator of transcription 1,STAT1)通路蛋白的表达变化.结果:肝癌组织中eEF1A1表达水平明显高于癌旁组织(P＜0.001),肝癌细胞中eEF1A1表达水平明显高于正常肝细胞(P＜0.001),并且eEF1A1高表达与肝癌大小及TNM分期密切相关(P＜0.01,P＜0.05).eEF1A1-shRNA-1/2转染后,肝癌Huh7细胞中eEF1A1 mRNA及蛋白的表达水平明显降低(P值均＜0.01),G1期细胞所占比例明显升高(P＜0.01),肝癌细胞的增殖活性明显降低(P＜0.01);pcDNA3.1-eEF1A1转染后肝癌SMMC7721细胞中eEF1A1 mRNA及蛋白的表达水平明显升高(P值均＜0.01),G1期细胞所占比例明显降低(P＜0.05),肝癌细胞的增殖活性明显增高(P＜0.05).随着eEF1A1基因表达下调,Huh7细胞中cyclin D2、STAT1总蛋白和核蛋白水平均明显下降(P值均＜0.05);而过表达eEF1A1后,SMMC7721细胞中cyclin D2、STAT1总蛋白和核蛋白水平均明显升高(P值均＜ 0.05);过表达eEF1A1基因的同时加入STAT1抑制剂作用后,cyclin D2、STAT1总蛋白和核蛋白水平均无明显变化(P值均＞0.05).结论:eEF1A1通过STAT1通路调控cyclin D2表达,从而促进肝癌细胞周期进展和细胞增殖.

关键词：癌、肝细胞、基因表达调控、肿瘤、细胞增殖、细胞周期、细胞周期蛋白D2、真核翻译延伸因子1A1

所属期刊栏目：38

分类号：R730.261(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;江西省自然科学基金;江西省青年科学基金;江西省青年科学基金

在线出版日期：2018-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：913-924