沉默DLX4基因表达可抑制前列腺癌细胞的迁移和侵袭

摘要：

目的:探讨抑制DLX4 (distal-less homeobox 4)基因的表达对人前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,以及其可能的作用机制.方法:分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测人前列腺癌 LNCap、DU145和PC-3细胞中DLX4 mRNA和蛋白的表达水平.将 DLX4 shRNA重组慢病毒pLKO.1-puro-shDLX4感染PC-3细胞(称为 PC-3-shDLX4细胞)后,应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别验证DLX4的敲除效果,应用MTT法和Transwell小室法分别检测PC-3-shDLX4细胞的增殖、迁移和侵袭能力,应用蛋白质印迹法检测PC-3-shDLX4细胞中上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)以及参与调控EMT的重要转录因子Snail和Twist蛋白的表达水平.结果:DLX4 mRNA和蛋白在人前列腺癌LNCap、DU145和PC-3细胞中均有较高水平的表达,PC-3细胞中DLX4 mRNA和蛋白的表达水平均高于LNCap和DU145细胞(P值均＜0.05).重组慢病毒pLKO.1-puro-shDLX4感染PC-3细胞后,PC-3细胞中DLX4基因表达被有效沉默, PC-3-shDLX4细胞中DLX4 mRNA和蛋白的表达水平均明显下调(尸值均＜0.05).PC-3-shDLX4细胞的增殖能力未发生明显改变(P＞0.05),而其迁移及侵袭能力却明显下降(P值均＜0.05).PC-3-shDLX4细胞中 Vimentin蛋白的表达水平明显下调(P＜0.05),而E-cadherin蛋白的表达水平明显上调(P＜0.05);参与调控EMT的Snail和Twist蛋白表达水平在PC-3-shDLX4细胞中亦明显下调(P值均＜ 0.05).结论:DLX4在前列腺癌细胞中表达水平较高,下调DLX4表达可能通过逆转Snail和Twist介导的EMT来抑制前列腺癌PC-3细胞的迁移和侵袭.

关键词：前列腺肿瘤、RNA干扰、上皮-间质转化、细胞运动、细胞迁移分析

所属期刊栏目：38

分类号：R737.25(肿瘤学)

在线出版日期：2018-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：419-428