乳腺癌MCF-7细胞通过TGF-β诱导的上皮-间质转化获得耐药

摘要：

目的:通过研究高侵袭转移性乳腺癌细胞株MDA-MB-231和低侵袭转移性细胞株MCF-7中上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)和耐药的相关性,以探讨乳腺癌耐药的机制.方法:采用实时荧光定量PCR法检测MDA-MB-231和MCF-7细胞中EMT标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和纤黏蛋白(fibronectin)以及转录因子Snail、Slug和锌指E-box同源结合框1(Zinc finger E-box binding homeobox 1, ZEB1) mRNA的表达水平;划痕愈合实验和Transwell小室实验分别检测MDA-MB-231和MCF-7细胞的迁移和侵袭能力;CCK-8法检测MDA-MB-231和MCF-7细胞对化疗药物5-氟尿嘧啶、顺铂和紫杉醇的敏感性,并采用实时荧光定量PCR法检测耐药基因多重耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1, MDR1)和MDR相关蛋白1 (MDR-associated protein, MRP1) mRNA的表达水平.用转化生长因子β(transforming growth factor-β, TGF-β)诱导MCF-7细胞发生EMT,或用靶向E-cadherin基因的E-cadherin-siRNA沉默EMT相关标志物E-cadherin的表达,再用CCK-8法检测MCF-7细胞对5-氟尿嘧啶敏感性的变化.结果:MDA-MB-231细胞中vimentin、fibronectin、 Slug和ZEB1 mRNA的表达水平均高于MCF-7细胞(P值均< 0.000 1), E-cadherin mRNA的表达水平明显低于MCF-7细胞(P=0.000 2), Snail mRNA的表达水平无明显差异.与MCF-7细胞相比,MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力明显更强(P值均< 0.000 1); 5-氟尿嘧啶、顺铂和紫杉醇对MDA-MB-231细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration, IC50)值明显高于MCF-7细胞(P值均<0.05); MDA-MB-231细胞中耐药相关基因MDR1和MRP1 mRNA表达水平明显更高(P值均< 0.000 1).TGF-p诱导MCF-7细胞发生EMT后,5-氟尿嘧啶对MCF-7细胞的IC50值明显上升(P<0.05);沉默E-cadherin表达后,MCF-7细胞对5-氟尿嘧啶的耐药性明显增强(P<0.05).结论:乳腺癌中EMT和耐药存在相关性,诱导EMT发生可导致细胞耐药.

关键词：乳腺肿瘤、上皮-间质转化、抗肿瘤联合化疗方案、抗药性、肿瘤

所属期刊栏目：38

分类号：R737.9(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目编号:81471687.National Natural Science Foundation of China 81471687

在线出版日期：2018-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：308-317,378